培養(yǎng)步驟:
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標準。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

細胞分類：

一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。
以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品： 

0.188ng/ml大鼠管生成素2(ANG-2)ELISA試盒Anti-hCD20-mIgG1

0.094ng/ml 大鼠管生成素1(ANG-1)ELISA試盒Anti-hTNF-α-hIgG1

46.9pg/ml大鼠管生長素(ANG)ELISA試盒Anti-hTNF-α-hIgG4

0.094ng/ml大鼠雄烯二(ASD)ELISA試盒Anti-hTNF-α-hIgA2

0.281pmol/ml大鼠雄激素(androgen)ELISA試盒Protein G / Agarose

0.094ng/ml大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試盒Anti-βGal-hCD3

0.094ng/ml大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試盒Anti-hCD19-βGal

0.188ng/ml大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試盒Anti-hCD19-CD3

46.9pg/ml大鼠巨噬細胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試盒 Anti-hCD20-Ga-hIgG1

0.094ng/ml大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試盒Anti-hCD20-Ga-hIgG1fut
人睪丸支持細胞母系胚胎亮氨拉鏈蛋白激酶(MELK)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠肝癌細胞，RH-35細胞

型肝炎病細胞受體2(HAVCR2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠肝細胞，BRL-3A細胞

RAS癌基因家族成員RAB1A(RAB1A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠肝星形細胞，CFSC-8B細胞

ISL LIM同源框蛋白1(ISL1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠回腸細胞，IEC-18細胞

Slingshot同源物1(SSH1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠腦I型星形膠質(zhì)細胞，CTX-TNA細胞

雙特性酪氨化調(diào)節(jié)激酶1A(DYRK1A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠腦間質(zhì)細胞，DI TNC1細胞

Slingshot同源物3(SSH3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞，C6細胞

Slingshot同源物2(SSH2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠腦星形膠質(zhì)細胞，CTX細胞

UDP葡萄糖醛轉(zhuǎn)移酶2家族多肽B7(UGT2B7)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠乳腺癌細胞，MADB106細胞

復(fù)制蛋白A1(RPA1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞 低分化，PC12低分化細胞

Discs大同源物3(DLG3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞 高分化，PC12高分化細胞

氨特性去基化酶4A(KDM4A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞 未分化，PC12未分化細胞

復(fù)制蛋白A1(RPA1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠腎細胞，NRK-52E細胞

蛋氨腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠腎小球系膜細胞，HBZY-1細胞

興奮性氨基轉(zhuǎn)運蛋白5(EAAT5)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠嗜性白病細胞，RBL-2H3細胞